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실험노트

遺伝子工学 実験ノート + 濃度計算

working 抗生物質 作製 

 

MS培地作製 ー プレート + 抗生物質添加

アラビ種まき

 

Agrobacterium 形質転換(Freeze&thaw法) 

LB培地作製(液体培地)→ 液体培養

グリセロールストック

Agro接種

 

プラスミドDNA精製 (mini prep)

DNA濃度分析 ー 分光光度計

電気泳動

 

1 step DNA 抽出

Genomic PCR

PCR産物(サンプル)精製+塩基配列分析依頼

 

sanpgene利用方法

制限酵素探索及び処理

 

顕微鏡の使い方 ー 花粉観察(ホモvsヘテロ)

 

腋芽培養

ーMS培地 + ピクロラム(2mg/L)

 

SDS-PAGE、ウェスタンブロット

 

<protein DMP9 amino acid sequence, RNA sequence>

LOCUS       NP_198781                244 aa

001 mekteesvgi rvytatppqk pspsppsrsp kpvlisslps lpsgaaaggg rgrkrrmvaq

061 gvqktvskts mlvnflptgt llmfemvlps iyrdgdcngi ntlmihllll lcamscfffh

121 ftdsfkasdg kiyygfvtpr glavfmkppp pefgggdvia eaeipvtddr ykltvndfvh

181 avmsvlvfma iafsdrrvtg clfpgkekem dqvmesfpim vgivcsalfl vfpttrygvg

241 cmtg

 

LOCUS       NM_123327                992 bp    mRNA 

001 cgatgaaact ctataaccgt caataaccgc cgcgatttga aaaataaata caaaaatctc

061 attctccatt aaaccattta acacaacata cgaaaaactg gtaaatcaca aaagaaaaaa

121 acagagagaa acacacgaaa (141)atggagaaaa ca(153)gaggaaag cgtcggaatc agagtttaca

181 cggcgactcc gccgcaaaaa ccatcaccat caccaccttc tcgttcacca aaacccgtct

241 taatctcttc attgccttcc ctcccgtcag gagccgccgc tggaggagga agaggtcgaa

301 aacgtcgcat ggtggcgcaa(320)ggagttcaaa aaacggtttc gaagacatca atgctcgtca

361 acttccttcc gacaggaaca ctcttgatgt tcgaaatggt tcttccatca atataccgtg

421 acggagactg taacggaatc aacacactca tgattcatct cctcttgctt ctttgcgcaa

481 tgtcttgttt cttcttccat tttaccgaca gtttcaaagc atccgatggg aagatctact

541 acggtttcgt gacgccacgt ggactcgcgg tgttcatgaa accgccgcct ccagagtttg

601 gtggcggaga tgttatagcg gaggcagaga ttccggtgac tgatgatagg tataagttga

661 cggttaatga ctttgttcat gcagtgatga gcgttttggt gtttatggcg attgcgtttt

721 cggatcgaag agtcacggga tgtttgtttc cagggaaaga gaaagagatg gatcaagtta

781 tggagagttt tccaataatg gttggaattg tttgtagtgc tttgtttctt gtttttccga

841 ccactcgata tggtgttggt tgcatgactg gt(872)taatttat tttcactttt ctgttttttg

901 gtttgtttta gtatctattt cgtattttcc ttgtaattta gattatctga tttaaactcc

961 aatgttctac tatttttatc tattgtattg tt